斑马鱼行为篇(101):斑马鱼视神经揉捏损害模型

发布时间:2025-08-03 作者: leyu手机版登录

  选用3-6个月龄的雄性和雌性野生型AB品系斑马鱼进行试验,一切成年斑马鱼均在斑马鱼养殖体系中养殖,光照周期为14小时/10小时(明/暗),水的温度为28.5℃,PH值为7.5、电导率为500μs/cm,而且每天喂养两次盐水虾。

  将野生型AB品系斑马鱼随机分为6组,分别为对照组,视神经揉捏损害后第1、4、7、10、14天组,对成年斑马鱼树立视神经揉捏损害模型。成年斑马鱼在0.02%三卡因溶液中麻醉充沛后,放在铺有湿润的纸巾的培养皿中,眼睛朝上。将斑马鱼置于体视显微镜下,在去除斑马鱼眼睛周围的结缔组织后,眼睛被细微地拉出眼眶,露出视神经和眼动脉。将Dumont5号镊小心肠放置在视神经周围,在距视神经头0.5mm处夹伤视神经10s,避免损害眼动脉及眼球。成功的斑马鱼视神经揉捏损害模型表现为在通明的视神经髓鞘内呈现了一个显着的空隙。随后,斑马鱼眼睛被放回眼眶内,斑马鱼被送回鱼缸中进行康复。

  运用视动反响和眼动反响检测斑马鱼视神经损害后视功用康复情况。对照组成年斑马鱼有安稳的视动反响,能够持续追寻光栅游动。斑马鱼在视神经揉捏损害后第1天和4地利,视动反响严峻受损,表现为不再跟随光栅移动,而是乱七八糟地游动。跟着时刻的推移,视动反响逐步康复,斑马鱼在视神经揉捏损害后第10天和第14地利,视动反响逐步康复到损害前水平。

  检测斑马鱼视神经揉捏损害后眼动反响的改变,斑马鱼在视神经损害后第1天和4地利无眼动反响,而在第7地利少部分斑马鱼中可检测到眼动反响,在斑马鱼视神经揉捏损害后第10天和14天,眼动反响逐步康复到损害前水平。

  OMR设备由外到内,顺次由环形的白色灯火,翻滚的是非光栅,通明的圆柱形鱼缸及不通明的圆柱形阻挠物组成;在环形的白色灯火照射下,内侧贴有是非条纹白纸的通明塑料圆柱旋转时,能构成翻滚的是非光栅影响,而且旋转的速度和方向以及是非光栅的间隔能够直接进行调整;成年斑马鱼在一个通明的圆柱形鱼缸中能够自在游动,不通明的圆柱放在鱼缸正中心,用来避免斑马鱼直接穿过中心区域游动;当是非光栅翻滚时,斑马鱼会跟随光栅做规则游动。每条鱼都在接连两次的一分钟试验中进行视动反响测验;影响形式的旋转方向一个是顺时针,另一个是逆时针,方向是随机的,这样做是为了扫除任何方向性误差;视动反响的契合率是斑马鱼追正确跟随光栅游动的时刻占整个调查时刻的份额。

  A:斑马鱼视动反响设备侧视图;B:斑马鱼视动反响设备俯视图,斑马鱼视动反响设备由环形的白色灯火,翻滚的是非光栅,通明的圆柱形鱼缸及不通明的圆柱形阻挠物组成。

  OKR设备和视动反响设备相似,由外到内,顺次由环形的白色灯火,翻滚的是非光栅及通明的圆柱形鱼缸组成;将斑马鱼身体固定在通明的圆柱形鱼缸底部,使斑马鱼眼睛坐落圆柱形鱼缸正中心;在是非光栅影响下,斑马鱼眼睛会跟随光栅翻滚,直至其眼睛不能再持续翻滚后,以一个急剧的眼球颤抖回到正位,随后进入下一个循环;为了确认视力,周/度(cyclesperdegree,cpd)运用以下公式核算:cpd=1/2[arctan(h/2a)],其间a是从斑马鱼晶状体中心到光栅的间隔,h是调查到OKR的最小光栅的一个周期的长度。

  胡海坚.非侵入式频亮光促进斑马鱼视神经再生的效果和机制研讨[D].南昌大学,2024.

  往期试验办法,需求的教师可根据以下操作进行查阅:进入大众号脑声常谈→底部菜单栏脑声帮手办法检索→最上方查找框输入试验称号,您找的试验办法就出来啦!

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